Для выявления скрытых, бессимптомных инфекций, особенно при поражениях полового члена, шейки матки, при конъюнктивитах, инфекционных поражениях ЦНС, резко выраженных локальных и диссеминированных формах болезни наибольшее значение имеет лабораторная диагностика. Диагностика вирусной герпетической урогенитальной инфекции основана на обнаружении в соскобах или мазках, взятых из основания свежих герпетических поражений кожи или слизистых оболочек мочеиспускательного канала, канала шейки матки, глаз, многоядерных гигантских клеток и внутриклеточных включений, а также на изоляции возбудителя в развивающихся куриных эмбрионах и тканевых культурах. Широкое применение находят цитологические методы; выделение и идентификация вируса; выявление вирусного антигена иммуноферментным методом; серологические исследования; полимеразная цепная реакция (ПЦР).
Цитологические методы. Соскобы из мочеиспускательного канала и шейки матки берут ложечкой Фолькмана. Предварительно шейку матки промывают раствором перекиси водорода, вытирают насухо стерильным ватным тампоном, а в случаях обильного отделяемого — ватным тампоном, смоченным в растворе антибиотиков (ристомицина и мономицина по 100 ЕД/мл). Из глаз новорожденных мазки берут стерильным ватным тампоном по общепринятой методике.
Иммунофлюоресцентное исследование.
Выделение вируса. Вирус может быть выделен из очагов поражения (кожи, слизистых оболочек, роговицы). Его можно обнаружить в мочеиспускательном канале, на шейке матки, гортани, слюне, фекалиях как во время первичной инфекции, так и в бессимптомный период болезни. Поэтому само но себе выделение вируса герпеса не служит достаточным доказательством того, что именно он является причиной данного заболевания.
Для выделения вируса, как правило, пользуются заражением тканевых культур. Появление типичного цитопатического эффекта и внутриядерных телец-включений в культуре свидетельствует о присутствии там вируса герпеса. Идентификацию выделенного агента проводят нейтрализацией его специфической противогерпетической сывороткой или посредством специфического иммунофлуоресцентного окрашивания зараженных клеток. С помощью тканевой культуры предположительный диагноз может быть поставлен через 24 ч после получения материала.
Серологическое исследование. При использовании большинства серологических методик получают перекрестные реакции между ВПГ-1 и ВПГ-2, поэтому дифференцировать первичные и вторичные инфекционные поражения нелегко.
Наблюдается также определенная перекрестная стимуляция между антигенами вирусов простого герпеса и ветряной оспы у пациентов, имевших ранее антитела к одному из этих вирусов.
Перспективны современные молекулярно-биологические методы (ПЦР, дот-гибридизация), которые позволяют диагностировать всю группу герпесвирусов. Однако каждый из этих методов диагностики имеет свои недостатки.
Наиболее часто используются одновременно несколько методов: выявление антигенов вирусов путем иммунофлюоресцентного, иммуноферментного или иммунопероксидазного исследования; обнаружение вирусного генома (ТЩР, дот-гибридизация); цитологические, электронно-микроскопические, серологические методы диагностики.